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洛阳地区种嗜尸性丽蝇和基因序列分析(2)
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摘要:表2 丽蝇科23个样本COⅠ基因序列在线BLAST比对结果注:1)本研究提交序列GenBank注册号;2)BLAST比对序列GenBank登录号编号 属 种 0 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 2
表2 丽蝇科23个样本COⅠ基因序列在线BLAST比对结果注:1)本研究提交序列GenBank注册号;2)BLAST比对序列GenBank登录号编号 属 种 0 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 GenBank注册号1)MF MF MF MF MF MF MF MF MF MF MF MF MF MF MF MF MF MF MF MF MF MF MF绿蝇属绿蝇属绿蝇属金蝇属金蝇属金蝇属绿蝇属绿蝇属叉丽蝇属叉丽蝇属丽蝇属丽蝇属丽蝇属阿丽蝇属阿丽蝇属阿丽蝇属绿蝇属绿蝇属绿蝇属绿蝇属绿蝇属绿蝇属绿蝇属丝光绿蝇丝光绿蝇丝光绿蝇大头金蝇大头金蝇大头金蝇铜绿蝇铜绿蝇叉丽蝇叉丽蝇反吐丽蝇反吐丽蝇反吐丽蝇巨尾阿丽蝇巨尾阿丽蝇巨尾阿丽蝇叉叶绿蝇亮绿蝇亮绿蝇亮绿蝇紫绿蝇紫绿蝇紫绿蝇BLAST比对结果Lucilia sericataLucilia sericataLucilia sericataChrysomya megacephalaChrysomya megacephalaChrysomya megacephalaLucilia cuprinaLucilia cuprinaTriceratopyga calliphoroides Triceratopyga calliphoroides Calliphora vomitoriaCalliphora vomitoriaCalliphora vomitoriaAldrichina grahamiAldrichina grahamiAldrichina grahamiLucilia caesarLucilia illustrisLucilia illustrisLucilia illustrisLucilia porphyrinaLucilia porphyrinaLucilia porphyrinaGenBank登录号2)KY.1 KY.1 KY.1 KR.1 KR.1 KR.1 MF0.1 KP.1 KP.1 KP.1 KM.1 KM.1 KM.1 KM.1 KX0.1覆盖率/相似度100%/100%100%/100%100%/99%100%/100%100%/100%100%/100%100%/100%100%/99%100%/100%100%/100%100%/100%100%/100%100%/99%100%/100%100%/100%100%/100%100%/100%100%/100%100%/100%100%/100%100%/100%100%/99%100%/99%
2.3 系统发育树分析
以家蝇(28SrRNA的GenBank登录号为KC.1,COⅠ的GenBank登录号为KF.1)为外群,GenBank中叉叶绿蝇的28S rRNA和COⅠ序列各两条纳入一并分析,运用MEGA 7.0软件对25个样本的基因序列进行分析,构建系统发育树,结果按照不同属、种分别聚类,分子鉴定结果和形态学鉴定结果一致(图1),效果较好。
28S rRNA基因序列构建的系统发育树显示:按照不同属种分别聚类,共5属9种,自上而下3只亮绿蝇、3只叉叶绿蝇、3只紫绿蝇、2只铜绿蝇、3只丝光绿蝇、2只叉丽蝇、3只巨尾阿丽蝇、3只反吐丽蝇、3只大头金蝇分别聚类,Bootstrap检验可信度分别为64%、93%、85%、97%、99%、64%、65%、64%和99%,绿蝇属的Bootstrap检验可信度为93%。
COⅠ基因序列构建的系统发育树显示:按照不同属种分别聚类,共5属9种,自上而下3只叉叶绿蝇、3只亮绿蝇、3只紫绿蝇、2只铜绿蝇、3只丝光绿蝇、3只巨尾阿丽蝇、2只叉丽蝇、3只反吐丽蝇、3只大头金蝇分别聚类,Bootstrap检验可信度分别为100%、98%、100%、85%、95%、100%、100%、100%和100%,绿蝇属的Bootstrap检验可信度为82%。
2.4 种内及种间进化分歧
经计算本研究中丽蝇科5属9种蝇类28S rRNA和COⅠ基因的遗传距离发现:不同蝇种28S rRNA基因序列种内差异为0,叉丽蝇、反吐丽蝇和巨尾阿丽蝇,叉叶绿蝇和亮绿蝇的种间差异均为0.001,叉丽蝇和反吐丽蝇,叉叶绿蝇和紫绿蝇的种间差异均为0.003,亮绿蝇和紫绿蝇的种间差异为0.004,丝光绿蝇和铜绿蝇的种间差异为0.008,其余种间差异为0.014~0.033;COⅠ基因序列种内差异为0~0.008,丝光绿蝇和铜绿蝇的种间差异为0.006~0.009,叉叶绿蝇和亮绿蝇的种间差异为0.011/0.013,其余种间差异为0.037~0.101。详见表3~4。
图1 基于25个样本28S rRNA和COⅠ基因序列构建的系统发育树A:基于28S rRNA基因序列;B:基于COⅠ基因序列;右侧依次显示为蝇种名称、GenBank登录号;左侧分支上的数字表示群聚的Bootstrap检验可信度(%);图左下方为标尺,表示0.0100进化距离的长度
表3 25个样本28S rRNA基因序列的种间差异和种内差异蝇类大头金蝇丝光绿蝇铜绿蝇叉丽蝇反吐丽蝇巨尾阿丽蝇叉叶绿蝇亮绿蝇紫绿蝇大头金蝇0 0.033 0.033 0.023 0.023 0.021 0.024 0.026 0.026丝光绿蝇 铜绿蝇 叉丽蝇 反吐丽蝇 巨尾阿丽蝇 叉叶绿蝇 亮绿蝇 紫绿蝇0 0.008 0.029 0.032 0.030 0.018 0.020 0.020 0 0.026 0.029 0.027 0.018 0.020 0.020 0 0.003 0.001 0.016 0.017 0.018 0 0.001 0.016 0.017 0.018 0 0.014 0.016 0.017 0 0.001 0.003 0 0.0040
表4 25个样本COⅠ基因序列的种间差异和种内差异注:“/”表示或丝光绿蝇 铜绿蝇 叉丽蝇 反吐丽蝇蝇类大头金蝇丝光绿蝇铜绿蝇叉丽蝇反吐丽蝇巨尾阿丽蝇叉叶绿蝇亮绿蝇紫绿蝇大头金蝇0 0.090/0.092 0.092/0.094 0.098 0.088/0.089 0.093 0.086 0.088/0.086 0.094~0.101巨尾阿丽蝇 叉叶绿蝇 亮绿蝇 紫绿蝇0.054/0.056 0.079 0.077 0.078/0.079 0.090/0.092 0/0.002 0.006~0.009 0.083/0.085 0.063~0.067 0.074/0.076 0.048/0.049 0.048~0.051 0.053~0.060 0 0/0.002 0.061/0.063 0.058/0.060 0.063~0.067 0.076~0.080 0.002 0.089/0.090 0.069~0.072 0.076/0.078 0.046/0.048 0.048~0.051 0.055~0.062 0 0 0.003~0.008 0.075 0.084/0.086 0.086~0.088 0.011/0.013 0.037~0.041 0/0.002 0.044~0.049
文章来源:《洛阳师范学院学报》 网址: http://www.lysfxyxb.cn/qikandaodu/2021/0323/540.html
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